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cck8实验的原理是什么?

在CCK-8试剂盒中,最主谨蠢要的化学药品是WST-8,化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐。

它的核心基团和MTT是一样的,是MTT的升级版本。在电子耦合试剂(也就是细胞是活的,有呼吸,有能量代谢)存在的情况下,可被NAD+氧化还原成为水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan)。活细胞越多,产生的Formazan就越多,颜色也会越深。

所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢,因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低,有些细胞在药物处理后,可能活细胞数不变,但是代谢率低了以后,细胞呼吸减弱,NAD+产生减少,测出的Formazan也会减少。

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扩展资料:

CCK8的用途

1、细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如肿瘤相关、损伤后修复等。

2、药物筛选:在测定一个药物的毒性和安全有效浓度时,经常会用到CCK-8。

3、细祥虚陪胞毒性测定:这个可以和各誉凯个处理因素对细胞活性和增殖的影响,比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。