Simone一、引物设计有3条基本原则：
1、引物与模板的序列要紧密互补。
2、引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构。
3、再次引物不能在衡升模板的非目的位点引戚猛发DNA聚合反应(即错配)。
二、PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功，但遵循某些原则，则有助于引物的设计。
扩展资料：
引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之间，Tm值曲线以选取72度附近为佳，5'到 3’的下降形状也有利于引物与模板的结合；
ΔG值（自由能）反应了引物与咐仔老模板结合的强弱程度，3'端的ΔG值相对要低，且绝对值不要超过9，否则不利于正确引发反应，3'末端双链的ΔG值在0--2kcal/mol时，PCR产量几乎达到百分之百，但在-6时只达到40%，-8时少于20%，-10时接近于0。
参考资料来源：百度百科-引物设计
